Обзор

Циркулирующие опухолевые клетки, выделяемые из первичных опухолей в кровоток, являются предметом исследований жидкой биопсии.Сепаратор циркулирующих опухолевых клеток обогащает эти редкие клетки из образца кровиВ данной статье объясняется принцип обогащения и почему CTC-сепарация наиболее ценна в сочетании с аналитическими методами, формирующими один модуль более широкого рабочего процесса.Понимание этого модульного дизайна помогает лабораториям планировать мощности и избегать чрезмерных инвестиций в любой шаг.

Принцип обогащения СТК

КТК чрезвычайно редки - зачастую всего несколько из миллионов клеток крови - поэтому прямой анализ непрактичен.Методы обогащения используют поверхностные маркеры, такие как EpCAM, которые обычно экспрессируются на эпителиальных опухолевых клеткахИммуномагнитный захват использует магнитные частицы, покрытые антителами, которые связывают целевые клетки; магнитное поле затем отделяет их от большинства красных и белых кровяных клеток,концентрация интересующейся популяции для исследования.

Сочетание с молекулярными и цитологическими тестами

Обогащенная фракция CTC становится вводом для комплементарных методов.в то время как геномные рабочие процессы, такие как секвенирование следующего поколения, могут исследовать изменения, которые могут быть использованы, как только будет собрано достаточное количество материала.При сочетании обогащения с этими анализами, один анализ крови поддерживает несколько направлений исследования вместо одного показания, увеличивая информацию, полученную из одного образца.

Рабочий процесс и образцы

Практический успех зависит от последовательной преданалитической обработки: своевременная обработка, правильный антикоагулянт и тщательное смешивание защищают целостность клеток.Лаборатории должны подтвердить, что этапа обогащения восстанавливает маркеры, имеющие отношение к их исследованию и восстановлению документов., потому что разные опухоли экспрессируют переменные поверхностные белки.Обращение с отделением CTC как с одним модулем в более широком рабочем процессе, а не как с отдельным результатом, дает наиболее интерпретируемые данные для исследователей и врачей.Для лабораторий, создающих сервис CTC, это помогает определить заранее подлежащий отчетности выход - будь то подсчет,Фенотип или геномный профиль - так что обогащение и шаги в дальнейшем направлении определяются в соответствии с этой целью- перекрестное обучение персонала как на инструменте для разделения, так и на аналитической платформе позволяет избежать узких мест при поступлении образцов партиями;и документированная стандартная операционная процедура обеспечивает сопоставимость результатов между операторами и сменамиПо мере того, как область созревает, сочетание обогащения с ортогональными методами также укрепляет уверенность в выводах о редких событиях, делая рабочий процесс больше, чем сумма его отдельных модулей.

Частые вопросы

Вопрос:Как захватываются циркулирующие опухолевые клетки?А:Обычно иммуномагнитная связь с маркерами поверхности, такими как EpCAM, а затем магнитное отделение от других клеток крови.

Вопрос:Какие тесты после обогащения CTC?А:Цитологическое окрашивание, FISH, иммунофлуоресценция или секвенирование генома, в зависимости от исследования или клинического вопроса.

Вопрос:Достаточно ли сбора крови для анализа CTC?А:Отправной точкой является венозный образец, но прежде чем проводить какой-либо значимый анализ, требуется своевременная обработка и обогащение.