Обзор

Разработанные в лаборатории иммуногистохимические (ИГХ) тесты на PD-L1, основанные на кроличьем моноклональном антителе E1L3N от Cell Signaling Technology (CST), широко используются там, где не требуется одобренный регулятором компаньон-диагностический тест. Клиническая полезность любого результата по PD-L1 сводится к нулю, если окрашивание варьируется между приборами, партиями или операторами. Для дистрибьюторов и отделов закупок референсных лабораторий коммерческий аргумент в пользу E1L3N основан на межплатформенной воспроизводимости, калибровке по референсным клонам и архитектуре контроля качества CAP/CLIA, которая удерживает межлабораторное согласие в установленных пределах.

Калибровка платформы и согласованность между приборами

Клон E1L3N связывается с внутриклеточным C-концевым доменом PD-L1, поэтому он легче переносит различные протоколы фиксации и ретривала, чем некоторые N-концевые антитела. Но сам по себе клон не гарантирует согласованности; результат является продуктом антитела, детекционной химии и прибора. Поэтому тесты на основе E1L3N требуют титрования, специфичного для платформы, для установления оптимального разведения и окна ретривала антигена на каждом автостейнере, а лаборатории, использующие E1L3N на нескольких платформах, должны продемонстрировать согласованность пороговых значений TPS и опухолевых клеток.

Согласованность на клинически значимых пороговых значениях, таких как TPS 1% и 50%, является основным показателем, поскольку небольшие отклонения вблизи границы принятия решения могут изменить пригодность пациента. Многие лаборатории сравнивают E1L3N с референсными тестами 22C3 и 28-8 на соответствующих микромассивах тканей; общий уровень согласованности выше 90% является эталоном.

Архитектура контроля качества CAP/CLIA

Устойчивая межплатформенная согласованность — это не одноразовое событие валидации; это непрерывная дисциплина, обеспечиваемая CAP и CLIA. Лаборатория должна зафиксировать преаналитические переменные — время формалиновой фиксации, толщину среза и ретривал антигена — поскольку E1L3N, как и все клоны PD-L1, чувствителен к чрезмерной и недостаточной фиксации. Контроли на срезе с известным высоким, низким и отрицательным уровнем экспрессии запускаются с каждой партией для проверки того, что окрашивание отражает истинную экспрессию, а не отклонение.

Система качества также требует тестирования на компетентность, проверки каждой новой партии антител от партии к партии и установленных политик по времени выполнения и повторному тестированию. CLIA устанавливает базовую компетентность; CAP добавляет инспекцию методом коллегиальной экспертизы и опросы на компетентность. Для покупателей поставщик, который прозрачно публикует свою матрицу валидации, сигнализирует о программе качества, достаточно надежной для защиты результатов по PD-L1.

Часто задаваемые вопросы

В: Является ли клон E1L3N взаимозаменяемым с компаньон-диагностическими тестами 22C3 или 28-8? О: Не автоматически. E1L3N — это разработанное в лаборатории антитело, которое должно быть валидировано по отношению к референсу, прежде чем результаты смогут направлять клинические решения. При соответствующей калибровке оно демонстрирует высокую согласованность с 22C3 и 28-8.

В: Какого уровня согласованности следует ожидать между E1L3N на двух разных ИГХ платформах? О: Сильные программы нацелены на общий уровень согласованности выше 90% на клинически значимых пороговых значениях TPS 1% и 50%. Незначительные отклонения в среднем диапазоне допустимы, если они не пересекают границы принятия решений.

В: Почему CAP/CLIA требует использования контролей на срезе при каждом запуске теста на PD-L1? О: Окрашивание PD-L1 чувствительно к вариациям фиксации и ретривала. Контроли на срезе с известным высоким, низким и отрицательным уровнем экспрессии в реальном времени выявляют процедурные отклонения, поэтому результату можно доверять только тогда, когда его рабочие контроли ведут себя ожидаемым образом.

В: Гарантирует ли аккредитация CAP, что наши результаты E1L3N совпадут с результатами референсной лаборатории? О: Аккредитация CAP гарантирует, что лаборатория следует дисциплинированным процессам и проходит опросы на компетентность, что сильно коррелирует с межлабораторным согласием. Это не гарантирует идентичные цифры, но существенно повышает вероятность согласованной классификации.